miR-200b对奶牛乳腺上皮细胞泌乳功能的影响
边艳杰
韩金汾
段江燕
1.山西师范大学 生物化学教研室,山西 临汾,0410042.山西师范大学 生物化学教研室,山西 临汾,0410043.山西师范大学 生物化学教研室,山西 临汾,041004
摘要：为探索miR-200b对奶牛乳腺上皮细胞泌乳能力的影响,以奶牛乳腺上皮细胞为体外研究模型,利用miR-200b mimics转染进行miR-200b过表达;应用生物信息学软件分析预测miR-200b靶基因,qRT-PCR检测miR-200b过表达后预测靶基因及乳成分合成相关信号通路关键基因mRNA表达的变化;通过CASY细胞活力分析仪及5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)标记法分别检测miR-200b过表达对细胞活力及增殖的影响;应用CSN2(β-酪蛋白)试剂盒、TG试剂盒及乳糖试剂盒检测细胞胞外分泌 β-酪蛋白、甘油三酯及乳糖含量的变化.生物信息学分析显示,miR-200b与乳腺泌乳功能基因Pten、Dnmt3a、Dnmt3b的3′UTR区序列具有互补结合的位点;qRT-PCR分析结果显示,与对照组相比,过表达miR-200b后的奶牛乳腺上皮细胞中Pten mRNA的表达量显著降低,而乳成分合成相关信号通路关键基因Akt、Srebp1、Csn2、Glut1 mRNA的表达量显著上调;miR-200b过表达能够提高奶牛乳腺上皮细胞活力,促进奶牛乳腺上皮细胞增殖及 β-酪蛋白、甘油三酯和乳糖的合成分泌.综上,miR-200b能够负调控靶基因Pten的表达进而在奶牛乳腺泌乳过程中发挥重要的正调控作用.
关键词：miR-200b基因过表达奶牛乳腺上皮细胞Pten泌乳调控
分类号：S823.9(家畜)
资助基金：国家自然科学基金(31701118)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 124-131 )
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