马铃薯M病毒微滴数字PCR检测方法的建立
刘晗1
黄洁芳2
向均1
燕照玲3
张永江1
1.中国检验检疫科学研究院,北京,1001762.吴江出入境检验检疫局,江苏吴江,2152003.河南省农业科学院农业经济与信息研究所,河南郑州,450002
摘要：为了建立马铃薯M病毒(Potato virus M,PVM)的精准检测技术,根据PVM外壳蛋白基因核苷酸保守序列设计微滴数字PCR(ddPCR)的引物、探针,建立PVM的ddPCR检测技术.以田间采集并经RT-PCR验证的PVM及其他4种同样可侵染马铃薯的病毒(PVX、PVY、CMV、TMV)总RNA为模板,进行ddPCR特异性分析;对PVM的总RNA进行10倍梯度稀释并用作模板,进行ddPCR灵敏度测定.结果表明,建立的ddPCR方法可以特异性地检测马铃薯上的PVM,与实时荧光RT-PCR结果一致;最低可检测5.7 fg/μL的总RNA,比实时荧光RT-PCR灵敏度高100倍.说明建立的ddPCR检测方法可用于PVM的准确鉴定.
关键词：马铃薯马铃薯M病毒微滴数字PCR实时荧光RT-PCR检测
分类号：S436.32(病虫害及其防治)
资助基金：国家重点研发计划(2016YFF0203203)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 69-74 )
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