Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒VP1基因在昆虫细胞中的表达及鉴定
顾玲玲
吴萌
朱善元
王安平
1.江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,江苏泰州,2253002.江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,江苏泰州,2253003.江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,江苏泰州,2253004.江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,江苏泰州,225300
摘要：为在昆虫细胞中表达Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-Ⅰ)的主要结构蛋白VP1,根据GenBank已发表的DHAV-Ⅰ SH株VP1基因序列,设计1对特异性引物,通过RT-PCR扩增VP1基因,将其克隆至杆状病毒转移载体pFastBac1,获得重组杆状病毒转移载体pFB-VP1,将其转化E.coliDH10Bac感受态细胞,经抗性、蓝白斑筛选及PCR鉴定后,构建重组穿梭质粒rBacmid-VP1.在脂质体介导下将重组质粒rBacmid-VP1转染昆虫细胞Sf 9,制备含有DHAV-ⅠVP1基因的重组杆状病毒rBac-VP1.Western blot结果显示,表达的重组蛋白VP1大小约27 ku,能与DHAV-ⅠVP1多克隆抗体发生特异性反应;间接免疫荧光检测结果显示,重组蛋白VP1能与DHAV-Ⅰ全病毒阳性血清发生特异性反应,细胞内出现较强的荧光.以上结果表明,在昆虫细胞中成功表达了具有免疫原性的DHAV-Ⅰ主要结构蛋白VP1.
关键词：Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒VP1基因昆虫细胞表达鉴定
分类号：S852.65+9(动物医学（兽医学）)
资助基金：国家自然科学基金(31302096)江苏省农业支撑项目(BE2013415)江苏省"六大人才高峰"高层次人才项目(NY-009)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 114-117 )
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