虎杖转录因子PcMYB1基因的克隆及原核表达
柳忠玉1
雷健1
李晓筱1
刘婵1
覃建兵1
许锋2
1.长江大学 生命科学学院,湖北荆州,4340252.长江大学 园艺园林学院,湖北荆州,434025
摘要：为了探明髓细胞组织增生病毒癌基因同源物(MYB)转录因子在虎杖苯丙烷代谢途径的作用,以虎杖叶片为材料,通过RT-PCR和RACE技术从虎杖中获得MYB转录因子基因,命名为Pc-MYB1,GenBank登录号为KY495789.序列分析表明,PcMYB1基因的cDNA序列全长1 152 bp,该基因开放阅读框为813 bp,编码270个氨基酸,推测蛋白质分子质量为30.455 ku.PcMYB1编码的氨基酸序列具有MYB类转录因子的共同特征,其N端具有R2、R3两个MYB结构域,同时其C端还存在一个抑制结构域C2基序pdLNL[D/E] LXI[G/S].系统进化树分析表明,该基因编码的蛋白质与矮牵牛PhMYB4的亲缘关系最近.将该基因片段连接到原核表达载体pET-28a中,构建融合表达质粒pET28a-PcMYB1,转化到E.coli BL21(DE3)中进行表达.SDS-PAGE电泳检测结果表明,表达蛋白与预期大小一致.成功克隆PcMYB1基因的全长序列,构建的原核表达载体pET28a-PcMYB1可用于该基因的功能研究.
关键词：虎杖MYB转录因子PcMYB1原核表达苯丙烷代谢RACE
分类号：S567.23(经济作物)
资助基金：国家自然科学基金(31670608)长江大学湿地生态与农业利用教育部工程研究中心开放基金(KF201511)国家级大学生创新创业训练计划项目(2017073)
论文发表日期：2018-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 96-102 )
英文信息