独行菜法尼基焦磷酸合酶基因的克隆与原核表达
马利刚1
赵乐1
付小蝶2
冯卫生1
匡海学3
郑晓珂1
1.河南中医药大学 药学院,河南 郑州 450046;呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心,河南 郑州 4500462.河南中医药大学 药学院,河南 郑州,4500463.黑龙江中医药大学 药学院,黑龙江 哈尔滨,150040
摘要：从独行菜(Lepidium apetalum)中克隆强心苷合成途径的法尼基焦磷酸合酶(FPS)基因,并在大肠杆菌中表达,为进一步研究独行菜强心苷的合成途径提供参考.分析前期获得的独行菜幼苗转录组数据,选择其中注释为FPS且具有完整开放阅读框的序列,从独行菜叶片cDNA中通过PCR克隆该序列,并进行序列分析.结果表明,克隆得到独行菜FPS基因的cDNA序列,GenBank登录号KY366218,命名为LaFPS.序列长度为1 332 bp,含有1 161 bp的开放阅读框,推测编码386个氨基酸.LaFPS蛋白可能不含跨膜结构,定位于线粒体中,含有聚异戊二烯合成酶结构域.LaFPS蛋白氨基酸序列与拟南芥(Arabidopsis thaliana)FPS1蛋白相似性高达92％,进化树分析结果表明,LaFPS与同为十字花科的拟南芥FPS1、遏蓝菜(Noccaea caerulescens)FPS1、高山南芥(Arabis alpina)FPS亲缘关系最近.构建的载体pET-32a-LaFPS可在大肠杆菌中成功诱导表达.表明成功克隆了独行菜FPS基因,并建立了其原核表达体系.
关键词：独行菜法尼基焦磷酸合酶基因克隆序列分析原核表达
分类号：S567(经济作物)
资助基金：国家重点基础研究发展(973)(973)河南中医学院博士科研基金(BSJJ2011-18)
论文发表日期：2017-09-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 92-97 )
英文信息