一种快速、特异性检测小麦中链格孢菌（Alternaria alternata）的巢式 PCR 方法
秦召1
李巧云2
段宗彪2
姜玉梅2
牛吉山2
1.河南农业大学 国家小麦工程技术研究中心，河南 郑州 450002; 河南农业大学 生命科学学院，河南 郑州 4500022.河南农业大学 国家小麦工程技术研究中心,河南 郑州,450002
摘要：为建立检测小麦中链格孢菌（Alternaria alternata ）的方法，从河南省小麦黑胚籽粒上分离得到7个优势 A．alternata 病原菌株，对其 rDNA 的内部转录间隔区序列（ITS）进行测序，序列比较表明，分离到的病原菌株与 GenBank 公布的 A．alternata 的 ITS 区序列一致性达到99％～100％。根据 Alternaria 属菌株（A．alternata、A．tenuis、A．tenuissima）和麦类根腐离蠕孢菌（Bipolaris sorokiniana ）的 ITS 序列比对结果，设计出1对 A．alternata 特异性引物 Aa1F/Aa1R。利用多种河南省小麦的主要病原真菌对该引物的特异性进行验证，只有在 A．alternata 中能特异性地扩增出1条443 bp 的 DNA 片段。以真菌通用引物 ITS1/ITS4为外侧引物、特异性引物Aa1F/Aa1R 为内侧引物进行巢式 PCR 扩增，能检测到 A．alternata DNA 的最低质量浓度为50 pg/μL。因此，建立的巢式 PCR 方法能够快速、特异地检测小麦中的 A．alternata。
关键词：小麦链格孢菌检测巢式 PCR
分类号：S435.121(病虫害及其防治)
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(2012AA101105)河南省科技攻关计划重大项目(122101110200)
论文发表日期：2014-10-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 67-73 )
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