根癌农杆菌介导致病疫霉转化体系的建立
赵冬梅
何佳昱
杨志辉
朱杰华
徐进
1.河北农业大学 植物保护学院,河北 保定,0710002.河北农业大学 植物保护学院,河北 保定,0710003.河北农业大学 植物保护学院,河北 保定,0710004.河北农业大学 植物保护学院,河北 保定,0710005.河北农业大学 植物保护学院,河北 保定,071000
摘要：为建立低成本、快速、高效的根癌农杆菌介导的致病疫霉转化体系，以菌株 HK0919为材料，从抗生素筛选浓度、共培养转膜方式、乙酰丁香酮（AS）浓度、共培养时间和共培养温度等方面对致病疫霉的转化体系进行了研究。综合各因素优化结果，建立的转化体系条件为：以1．0μg/mL的潮霉素B进行转化子筛选，采用玻璃纸作为共培养介质，AS浓度为200μmol/L，培养6 d，温度为22℃。在此条件下的转化效率为每106个游动孢子获得50～60个转化子。随机选取10个转化子，利用特异性引物对潮霉素抗性基因hph进行PCR扩增，转化子均能扩增出800 bp左右的预期条带；同时，利用根癌农杆菌vir基因特异引物对转化子进行 PCR扩增，排除了转化子被农杆菌污染所致的假阳性；转化子继代培养5代后，仍能在含潮霉素 B的黑麦培养基上生长。说明外源T DNA已成功整合到致病疫霉基因组中，并能稳定遗传。
关键词：致病疫霉根癌农杆菌介导的转化T DNA转化效率
分类号：S436.31(病虫害及其防治)
资助基金：现代农业产业技术体系建设专项(CARS10P12)
论文发表日期：2014-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 83-87 )
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