甘薯褪绿矮化病毒外壳蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
秦艳红
乔奇
张德胜
田雨婷
王爽
王永江
张振臣
1.河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防控重点实验室,农业部华北南部农作物病虫害综合治理重点实验室,河南郑州 4500022.河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防控重点实验室,农业部华北南部农作物病虫害综合治理重点实验室,河南郑州 4500023.河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防控重点实验室,农业部华北南部农作物病虫害综合治理重点实验室,河南郑州 4500024.河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防控重点实验室,农业部华北南部农作物病虫害综合治理重点实验室,河南郑州 4500025.河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防控重点实验室,农业部华北南部农作物病虫害综合治理重点实验室,河南郑州 4500026.河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防控重点实验室,农业部华北南部农作物病虫害综合治理重点实验室,河南郑州 4500027.河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防控重点实验室,农业部华北南部农作物病虫害综合治理重点实验室,河南郑州 450002
摘要:克隆甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)外壳蛋白(CP)基因,构建其原核表达载体,并在大肠杆菌中进行诱导表达.根据已报道的甘薯褪绿矮化病毒西非(WA)株系基因组核苷酸序列设计引物,利用RT-PCR方法克隆了SPCSV四川分离物基因组RNA2上1 902 bp大小的片段.序列分析表明,该片段包括部分p60基因序列、完整的p8基因和CP基因(major CP)序列及部分mCP基因(minor CP)序列.CP基因由774个核苷酸组成,编码257个氨基酸残基,与已发表的SPCSV WA株系Can181-9分离物相比,其核苷酸和氨基酸序列一致性分别为99.48%和99.22%.将CP基因克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CP基因在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达的融合蛋白分子量约为38 kD,为SPCSV抗血清的制备及其血清学检测技术的建立奠定了基础.
关键词:甘薯褪绿矮化病毒基因克隆序列分析外壳蛋白原核表达
分类号:S436.32(病虫害及其防治)
资助基金:国家甘薯产业技术体系建设项目(CARS-11-B-07)
论文发表日期:2013-01-01
在线出版日期:2026-09-12(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 85-87,120 )
英文信息展开
河南农业科学

河南农业科学

北大核心CSTPCD
ISSN:1004-3268
年,卷(期):2013,42(6)
所属栏目:植物保护