棉花银染mRNA差异显示体系优化研究
代常波1
王清连2
胡根海2
郭敏敏1
1.河南师范大学,生命科学学院,河南,新乡,453007;河南科技学院,生命科技学院,河南,新乡,4530032.河南科技学院,生命科技学院,河南,新乡,453003
摘要：mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)是分离差异表达基因的有效方法.以陆地棉组织培养过程中不同时期愈伤组织为材料,对RNA提取、PCR反应体系、银染条件等影响mRNA差异显示的关键因素进行优化试验,建立了一套适合棉花组织培养的mRNA差异显示体系.最终确定了优化体系(50 μL)为:随机引物0.4 μmol/L,锚定引物0.4 μmol/L,dNTP 250 μmol/L,Mg2+1.5 mmol/L,Taq酶1.5 U,退火温度为39.3℃.利用优化后的体系对材料进行扩增,扩增产物特异性好、条带清晰、背景干净.该体系简便、快捷、灵敏、高效,可用于分离差异表达基因.
关键词：棉花愈伤组织体系优化mRNA差异显示银染
分类号：S562(经济作物)
资助基金：国家科技支撑计划(2006BAD01A05-27)河南省自然科学基金(0411034100)
论文发表日期：2008-11-30
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 31-35 )
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