α-淀粉酶基因启动子-35区的诱变及其对大肠杆菌内表达量的影响
黄春晓1
崔锦2
马向东2
1.河南农业大学生命科学学院,河南,郑州,450002;中原工学院能源与环境学院,河南,郑州,4500072.河南农业大学生命科学学院,河南,郑州,450002
摘要：对来自野油菜黄单胞菌的α-淀粉酶基因(Gene Bank的序列号为AY167892)的启动子进行定点诱变,研究启动子的碱基改变对该基因在大肠杆菌中表达量的影响,在基因工程中有重要的意义.以α-淀粉酶基因连接到pBluescript KS+形成的重组质粒PHNH003为模板,通过PCR得到该α-淀粉酶基因启动子-35区上游序列截短141bp的基因,并通过定点诱变改变该截短基因启动子-35区第2位和第3位的碱基(即TGCACA→TTGACA),分别把这2个基因克隆至pBluescript KS+并转化大肠杆菌DH5α.并把PHNH003转化至大肠杆菌DH5α,作为对照菌株.结果表明,含截短基因的菌株的α-淀粉酶活性比对照菌株提高24%;含点突变的截短基因的菌株的α-淀粉酶活性比对照提高100%.并分析了α-淀粉酶基因启动子-35区上游序列及-35区2个碱基的突变对基因在大肠杆菌中表达量的影响.
关键词：α-淀粉酶基因启动子定点诱变大肠杆菌表达
分类号：Q814(酶工程)
资助基金：河南省科技攻关计划(0223013500)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 24-27 )
英文信息