RNA干扰对雄激素合成关键酶17α-羟化酶/17,20裂解酶作用的实验研究
杜静
梁晓燕
曾海涛
舒益民
姚书忠
朱波
庄广伦
1.中山大学附属第一医院生殖中心,广州,5100802.中山大学附属第一医院生殖中心,广州,5100803.中山大学附属第一医院生殖中心,广州,5100804.中山大学附属第一医院生殖中心,广州,5100805.中山大学附属第一医院生殖中心,广州,5100806.中山大学附属第一医院生殖中心,广州,5100807.中山大学附属第一医院生殖中心,广州,510080
摘要:目的:探讨细胞色素P450 17α-羟化酶/17,20裂解酶(CYP17)小干扰RNA (siRNA)对CYP17基因表达和多囊卵巢综合征(PCOS)卵泡膜细胞雄激素合成的抑制效果.方法:合成4条靶向CYP17基因的特异性siRNA和非特异性siRNA.将0.4μg携带报告基因增强型绿色荧光蛋白和CYP17基因的质粒和siRNA共转染入HeLa细胞,荧光显微镜观察及流式细胞术检测绿色荧光蛋白的表达反映对CYP17表达的影响,筛选抑制效果最佳的siRNA.卵泡膜细胞取自PCOS患者和非PCOS妇女各5例,将筛选出的最佳CYP17 siRNA以最佳浓度转染人卵泡膜细胞,荧光定量实时逆转录多聚酶链反应检测CYP17 mRNA的表达,并且检测培养液中CYP17作用产物雄烯二酮和前体孕酮水平.结果:siRNA 1221处理后,HeLa细胞中外源性CYP17的表达显著降低,抑制率达50%,卵泡膜细胞中CYP17 mRNA水平和雄烯二酮产生降低,但与对照组比较,统计学上无显著差异.结论:RNA干扰技术可能提供一种PCOS高雄激素基因治疗的新方法.
关键词:RNA干扰细胞色素P45017α-羟化酶/1720裂解酶雄激素合成多囊卵巢综合征卵泡膜细胞
资助基金:国家自然科学基金(30571956)国家自然科学基金(30300372)广东省自然基金(31690)广东省自然基金(21874)GZST(2004J-C0111)
论文发表日期:2008-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 219-221 )
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国际妇产科学杂志

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ISSN:1674-1870
年,卷(期):2008,35(3)
所属栏目:论著