血管内皮细胞生长因子表达质粒的构建及其促进烫伤愈合的研究
孙丹
付小兵
陈伟
孙同柱
黎君友
盛志勇
1.100037,北京,解放军第304医院全军烧伤研究所基础部2.100037,北京,解放军第304医院全军烧伤研究所基础部3.100037,北京,解放军第304医院全军烧伤研究所基础部4.100037,北京,解放军第304医院全军烧伤研究所基础部5.100037,北京,解放军第304医院全军烧伤研究所基础部6.100037,北京,解放军第304医院全军烧伤研究所基础部
摘要：构建血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达质粒,并观察其表达产物对小型猪深度烫伤创面影响.采用PCR技术和DNA重组技术,从胎肝细胞内将编码人VEGF的cDNA序列克隆至表达载体pQE-40上,挑取阳性克隆扩增后,提取DNA进行酶切鉴定和测序.同时通过SDS-PAGE和western blot方法对其表达产物进行特异性鉴定.猪小面积深Ⅱ度烫伤后,立即将含有1.5μg/g VEGF的表达产物制成的膏剂均匀涂于创面,每个创面200mg膏剂,隔日换药一次,至伤后14d.用透明膜描记称量法记录创面面积,并取创面组织作组织学和免疫组化检测.克隆出的VEGF基因cDNA片段由380bp组成,包括翻译起始密码子、编码序列和终止密码子等部分.重组表达质粒pQE-VEGF在M15细菌体内能够表达.小型猪烫伤后7d,VEGF处理的伤口处肉芽组织增生明显,毛细血管数量增多.烫伤14d后,M15处理组的创面仍未愈合,VEGF组的创面可见连续的上皮覆盖,CD34阳性细胞率与M15处理组相比明显升高,两者差异显著(P＜0.01).构建的VEGF表达载体可以编码VEGF121蛋白,其表达产物能够诱导肉芽组织生长,刺激血管内皮细胞增殖,加速新生血管形成,促进创面愈合.
机标关键词：血管内皮细胞生长因子重组表达质粒构建创面血管内皮细胞增殖深Ⅱ度烫伤肉芽组织增生表达载体
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
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