肠道病毒71型VP1基因的表达纯化及初步应用
王云龙1
刘元帅1
董彩文1
孙新城1
李玉林2
刘旺根2
昌静峰2
王国强2
张曼莉2
王继创2
秦贵军3
1.郑州轻工业学院食品与生物工程学院,郑州,4500022.河南省生物工程技术研究中心,郑州,4500013.郑州大学第一附属医院内分泌科,郑州,450052
摘要：目的 表达纯化肠道病毒71型(EV71)VP1蛋白,初步建立人血清中抗EV71 IgG间接ELISA检测方法.方法 通过化学法合成肠道病毒71型VP1全基因序列,构建重组质粒pET-43.1a(+)/VP1,转化大肠杆菌BL21(DE)3,IPTG诱导表达,镍金属亲和层析纯化目的蛋白,产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定.以目的蛋白作为包被抗原,初步建立间接ELISA检测方法,并对77份6～10岁无手足口病症状儿童血清及手足口病现症患儿血清进行检测.结果 成功构建重组质粒pET-43.1a(+)/VP1,VP1融合蛋白分子量约为43 kD,纯度可达95%;初步建立了人血清中抗EV71 IgG间接ELISA 检测方法,36例HFMD现症患儿中EV71 IgG阳性22例(61.11%);41例无手足口症状儿童血清中 EV71 IgG阳性21 例(51.22%).结论 表达产物具有较好的免疫原性,可用于肠道病毒71抗体检测.
关键词：肠道病毒71VP1表达纯化间接ELISA
资助基金：河南省科技发展计划(102102310093)
论文发表日期：2011-07-17
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1849-1851 )
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