FLAG Pull-down技术筛选LASP-1相互作用蛋白
赵亮
丁彦青
1.南方医科大学南方医院病理科,广州,5105152.南方医科大学南方医院病理科,广州,510515
摘要：目的 筛选与LASP-1蛋白发生相互作用的蛋白质.方法 构建携带FLAG标签的LASP-1融合表达载体,转染人结直肠癌细胞系SW480表达FLAG-LASP-1融合蛋白,用FLAG-M2亲和柱筛选并经SDS-PAGE分析差异条带,切取差异条带酶解进行质谱鉴定.结果 成功构建pcDNA3-FLAG-LASP-1真核表达载体,转染SW480细胞表达FLAG-LASP-1融合蛋白,SDS-PAGE电泳分离得到8个差异蛋白条带,质谱鉴定LASP-1相互作用蛋白78 kDa葡萄糖调控蛋白(GRP78)和热休克同源蛋白71(HSC71).结论 GRP78、HSC71均可能与LASP-1存在相互作用,这将为进一步研究LASP-1的功能和作用机制提供依据.
关键词：LASP-1FLAG Pull-down相互作用蛋白蛋白质组学
资助基金：国家自然科学基金(30901792)
论文发表日期：2010-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 2237-2240 )
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