人骨唾液蛋白膜靶向表达载体的构建及在乳腺癌细胞中的表达
杜红延1
王捷2
郑霖2
杨静2
刘大志2
1.南方医科大学生物技术学院,广州,5105152.广州军区广州总医院医学实验中心,广州,510010
摘要：目的构建人骨唾液蛋白(BSP)膜靶向表达载体,并转染人乳腺癌细胞,筛选获得稳定转染细胞,为进一步体内外研究BSP在乳腺癌骨转移中的作用奠定基础.方法通过PCR的方法从pB-hBSP载体中亚克隆人骨唾液蛋白hbsp基因,定向克隆至细胞膜靶向定位真核表达载体pDisplayTM中,构建中间重组载体pDisplay-hB-SP,再次通过PCR的方法从构建的pDisplay-hBSP载体中亚克隆出膜靶向信号肽、hbsp以及细胞膜定位蛋白基因,定向克隆至真核表达载体pIRES2-EGFP,构建重组复合载体pID-hBSP-EGFP,利用脂质体转染特异性骨转移的乳腺癌细胞.结果重组载体pDisplay-hBSP和pID-hBSP-EGFP插入目的片段的测序结果与Genbank中发表的BSP序列基本一致.结论成功构建了人骨唾液蛋白膜靶向表达载体,并且经转染后成功在特异性骨转移的乳腺癌细胞株MDA-MB-231BO中表达.为下一步进行体内外试验研究BSP在乳腺癌骨转移中的作用奠定基础.
关键词：骨唾液蛋白细胞膜绿色荧光蛋白乳腺癌细胞表达
分类号：R73(肿瘤学)
资助基金：广东省博士启动基金(04003534)广东省医学科研基金(A2002536)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 659-661 )
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