人脐带源间充质干细胞分离培养方法的改进
李艳琪1
王洪一2
姚尧2
刘晶晶3
徐潇2
张宇2
刘洋3
吴祖泽4
靳继德5
1.天津大学化工学院制药工程系系统生物工程教育部重点实验室,天津市,3000722.解放军沈阳军区总医院,辽宁省沈阳市,1100163.北京工业大学生命科学与生物工程学院,北京市,1000224.天津大学化工学院制药工程系系统生物工程教育部重点实验室,天津市 300072; 军事医学科学院放射与辐射研究所,北京市 1000395.军事医学科学院放射与辐射研究所,北京市,100039
摘要:背景:脐带来源的间充质干细胞因其具有高度的自我更新和多向分化潜能,以及取材方便等优点而日益受到关注。<br>  目的:建立一种改进的人脐带间充质干细胞分离、培养方法,并对其生物学特性进行分析。<br>  方法:无菌条件下获取足月妊娠分娩胎儿脐带,利用改良的组织块贴壁法分离培养脐带间充质干细胞,即将传统组织贴壁法中本应丢弃的组织转移到新的培养瓶中进行二次贴壁培养,取第3代脐带间充质干细胞进行生物学特性分析。<br>  结果与结论:组织贴壁后第5-7天可见有梭形细胞从组织块边缘爬出,第10天左右可形成明显的细胞克隆。将组织块转移到新培养瓶中继续培养,2d后即可见有细胞爬出,细胞生长速度较快,5d即可形成细胞克隆。传代后的细胞形态均一,呈成纤维细胞样的长梭形。流式细胞仪检测细胞高表达CD90、CD105,不表达CD34、CD45、HLA-DR。细胞增殖能力旺盛,平均倍增时间为50 h左右,41.24%的细胞处于G2/S期。体外可诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞。上述实验结果证明二次贴壁培养出的细胞也具有间充质干细胞的生物学特性,而且通过这种培养方法获得的原代间充质干细胞数是传统方式培养的2倍。
关键词:干细胞脐带脐血干细胞脐带间充质干细胞分离培养二次贴壁
分类号:R394.2(医学遗传学)
论文发表日期:2014-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 1609-1614 )
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中国组织工程研究

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北大核心CSTPCD
ISSN:2095-4344
年,卷(期):2014,(10)
所属栏目:研究与报告 -- 脐带脐血干细胞