摘要：背景:位于脑室区和脑室下区的神经干细胞对大脑皮质的神经发育及神经退行性疾病的治疗至关重要,但具体调控机制尚未完全阐明.miRNA-9(miR-9)是脊椎动物早期及成年大脑中表达最丰富的miRNAs之一,在发育过程中具有多种功能,然而miR-9在神经干细胞分化中的作用尚不清楚. 目的:探讨miR-9在调控脑室区和脑室下区神经干细胞分化中的作用. 方法:分离胚胎14.5 d ICR小鼠脑室区和脑室下区神经干细胞,采用原代培养技术在增殖培养基中培养三四天形成神经球后,通过Pax6/Nestin免疫荧光双染鉴定细胞干性.采用qRT-PCR检测胚胎12.5,14.5,16.5,18.5 d和出生后0,7 d不同发育阶段端脑组织以及胚胎14.5 d体外培养神经干细胞中miR-9的表达谱.使用转染试剂miR-9抑制剂和模拟物对神经干细胞进行转染,转染24 h后继续分化三四天(神经元)和6-8 d(胶质细胞),通过Tuj1(神经元标志物)、髓鞘碱性蛋白(少突胶质细胞标志物)和胶质纤维酸性蛋白(星形胶质细胞标志物)免疫荧光染色定量各谱系分化情况. 结果与结论:qRT-PCR结果显示,miR-9在胚胎早期(胚胎12.5 d-14.5 d)端脑组织中呈现高表达,随发育进程(胚胎16.5 d至出生后7 d)表达量逐渐降低.胚胎14.5 d神经干细胞中miR-9表达水平接近内参RNU6B表达水平的90%.功能实验表明,与对照组相比,miR-9抑制组Tuj1阳性神经元和髓鞘碱性蛋白阳性少突胶质细胞比例降低,而胶质纤维酸性蛋白阳性星形胶质细胞比例升高.相反,miR-9过表达组Tuj1阳性神经元和髓鞘碱性蛋白阳性少突胶质细胞比例升高,胶质纤维酸性蛋白阳性星形胶质细胞比例降低,差异均有显著性意义(P<0.001).结果表明,miR-9在神经干细胞分化中呈现双向调控作用:①通过发育阶段特异性表达模式(早期高表达,后期下调)参与神经发生时序调控;②通过促进神经干细胞向神经元和少突胶质细胞分化、同时抑制星形胶质细胞生成来维持三系分化平衡.

摘要：背景:老年股骨转子间骨折患者常伴多种内科合并症及明显骨质疏松,给治疗带来较大挑战.股骨近端防旋髓内钉与InterTAN均为常用髓内钉内固定系统,如何为不同病情和骨折类型的患者精准选择最合适的治疗方案尚缺乏足够的循证依据. 目的:对比带双螺纹钉的近端股骨髓内钉系统(InterTAN)与股骨近端防旋髓内钉内固定治疗老年股骨转子间骨折的临床效果及并发症差异. 方法:采用前瞻性随机对照设计,纳入118例符合纳入标准的老年股骨转子间骨折患者,随机分为2组,股骨近端防旋髓内钉组59例行股骨近端防旋髓内钉内固定,InterTAN组59例行InterTAN髓内钉内固定.围术期记录手术时间、术中出血量、透视次数、住院天数等指标;术后于1,3,6,12个月进行随访,通过Harris髋关节功能评分及影像学检查评估骨折愈合率、内固定稳定性及并发症发生情况. 结果与结论:①股骨近端防旋髓内钉组手术时间、出血量、透视次数均显著低于InterTAN组(P<0.001),两组住院天数相比差异无显著性意义(P>0.05);②术后12个月,两组患者骨折愈合率相近(P>0.05);术后12个月时InterTAN组内固定不稳定率显著降低(P<0.05),Harris疼痛、功能及关节活动度评分均明显优于股骨近端防旋髓内钉组(P<0.05);两组并发症总发生率相比差异无显著性意义(P>0.05);③提示股骨近端防旋髓内钉在围术期创伤方面具备一定优势,而InterTAN在术后1年随访时的固定稳定性及功能恢复上更具潜在价值,临床应结合患者病情和骨折类型综合选择内固定系统.

摘要：背景:颈椎斜扳手法治疗颈椎病具有良好的效果,但该治疗手法对不同退变程度椎间盘的生物力学作用机制尚不明确. 目的:通过三维有限元模型探讨斜扳手法对不同退变程度椎间盘的生物力学作用机制. 方法:通过运动捕捉系统测量斜扳手法操作时关键步骤的运动学参数.建立C5/6 节段轻、中、重度退变椎间盘的全颈椎三维有限元模型,将斜扳手法的运动学参数转换成力矩分步加载至轻、中、重度退变椎间盘全颈椎三维有限元模型上,获得模拟斜扳手法操作时模型中各结构的应力应变等生物力学参数. 结果与结论:①在模拟斜扳手法向右侧扳动时,随着椎间盘退变程度的增加,纤维环Von-Mise应力逐渐变大,应力均集中在纤维环右外侧;髓核Von-Mise应力减小,应力集中于髓核和纤维环交界位置;椎间盘整体位移减小,左侧小关节应力减小,脊髓Von-Mise应力增大,脊髓应力集中于上颈椎.②在模拟斜扳手法向右侧扳动时,随着椎间盘退变程度的增加,C5/6节段椎间盘整体应变、髓核内压、左侧神经根应力减小,椎间盘剪切力增大,左侧神经根与椎间盘的相对距离加大,右侧神经根与椎间盘的相对距离变化不明显.③结果表明,颈椎斜扳手法通过调整小关节应力及增大神经根间距改善轻、中度退变椎间盘的生物力学失衡,但对于重度退变椎间盘可能因纤维环应力剧增与脊髓受压风险需谨慎使用.

摘要：背景:β-磷酸三钙生物陶瓷棒的弹性模量与正常骨组织较为接近,并且展现出卓越的生物兼容性和力学特性,可作为髓芯减压后股骨头内部的支撑材料.但目前股骨头坏死及陶瓷棒置入后股骨头相关应力位移变化情况等生物力学相关研究较少. 目的:探究围塌陷期股骨头坏死治疗过程中髓芯减压陶瓷棒置入对股骨头生物力学的影响. 方法:筛选围塌陷期股骨头坏死髓芯减压陶瓷棒置入患者19例共 21髋,获取术前术后影像学资料.在Mimics 21.0软件中载入患者髋关节CT图像,构建出股骨头的三维模型,创建包含皮质骨和松质骨的股骨近端整体模型,以及股骨近端松质骨模型.再将患者的术前MRI影像资料导入,运用图形匹配技术,制作坏死灶模型,并以.stl格式保存,将其转移到Geomagic 2012软件中,进行光滑和精确曲面处理.随后在SolidWorks 2021软件中进行陶瓷棒设计并建模,导入相关模型进行装配和布尔运算,确保干涉检查无误后,利用ANSYS 2021软件计算并观察单足站立及行走后蹬阶段股骨头负重区、坏死区应力及位移情况. 结果与结论:①股骨头承受最大应力的区域位于坏死部分的前外侧上方,在单足站位时,术后负重区及坏死区应力值较术前显著降低(P<0.05),股骨头塌陷值(负重区位移值)较术前降低(P<0.05);②在行走后蹬阶段,随着所受载荷的增加,术后负重区及坏死区应力值及股骨头塌陷值(负重区位移值)均有所增加,但仍低于术前(P<0.05);③提示髓芯减压联合陶瓷棒置入有助于降低股骨头表面负重区域的负荷,使负重区域的应力得到有效分散,载荷部分向股骨矩方向传递,改善局部应力集中状态,有效支撑股骨头以防止进一步塌陷.

摘要：背景:现有研究提示髋臼覆盖度可能是特发性股骨头坏死发病的危险因素,但目前尚缺乏不同亚型股骨头坏死之间髋臼覆盖度比较的研究. 目的:探讨髋臼覆盖度与特发性股骨头坏死发病的关联. 方法:收集2018年1月至2024年6月在中国中医科学院望京医院就诊的特发性股骨头坏死患者54例(87髋),配对组162例(261髋),包括激素性股骨头坏死、酒精性股骨头坏死和无明显髋关节病变患者.通过标准化影像学测量方法,由独立研究者测量骨盆正位X射线片的4项髋臼形态参数:中心边缘角、髋臼角、髋臼深度比及髋臼头指数. 结果与结论:①特发性股骨头坏死组中心边缘角显著小于配对组[(27.4±4.5)° vs.(32.4±5.7)°],特发性股骨头坏死组髋臼角显著大于配对组[(40.2±3.5)° vs.(38.7±2.9)°],特发性股骨头坏死组髋臼深度比(276.4±33.3 vs.319.3±31.6)和髋臼头指数(82.4±5.1 vs.85.4±4.2)显著小于配对组(均P<0.001);②与激素性股骨头坏死亚组相比,特发性股骨头坏死组中心边缘角更小[(27.4±4.5)° vs.(33.0±5.2)°]、髋臼角更大[(40.2±3.5)° vs.(38.7±3.1)°],髋臼深度比和髋臼头指数更低(均P<0.05);③与酒精性股骨头坏死亚组相比,特发性股骨头坏死组同样表现出更小的中心边缘角[(27.4±4.5)° vs.(32.7±5.4)°]、更大的髋臼角[(40.2±3.5)° vs.(38.7±3.0)°],以及更低的髋臼深度比和髋臼头指数(均P<0.05).结果表明,特发性股骨头坏死患者存在特征性的髋臼覆盖不足,表现为中心边缘角减小、髋臼角增大、髋臼深度比和髋臼头指数降低,这一解剖学特征可能作为特发性股骨头坏死的潜在危险因素,并有助于与其他股骨头坏死亚型鉴别诊断.建议在临床评估中关注髋臼形态,以优化早期筛查和个体化干预策略.

摘要：背景:间充质基质细胞的T细胞免疫抑制作用为自身免疫性疾病的治疗带来新的希望,人脐带间充质基质细胞治疗药物艾米迈托赛注射液已被批准用于治疗14岁以上以消化道受累为主的激素治疗失败的急性移植物抗宿主病.因此,进一步探索间充质基质细胞的T细胞免疫抑制潜力能够为自身免疫性疾病治疗奠定基础. 目的:细胞程序性死亡配体1基因过表达对人脐带间充质基质细胞抑制CD4+T细胞增殖的影响. 方法:①人脐带间充质基质细胞体外培养至第0,1,2,3代,流式细胞仪检测细胞程序性死亡配体1阳性细胞比率;②将人脐带间充质基质细胞分为实验组和阴性对照组,实验组采用慢病毒介导细胞程序性死亡配体1基因修饰人脐带间充质基质细胞,阴性对照组为转染空白质粒载体慢病毒的人脐带间充质基质细胞,流式细胞术、实时荧光定量PCR和Western blot检测转染效率;③从健康人外周血中磁珠富集CD4+T细胞,经羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯标记后以5∶1的比例与实验组和阴性对照组人脐带间充质基质细胞共培养,通过流式细胞术检测羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯衰减的CD4+T细胞比例;④对实验组和阴性对照组人脐带间充质基质细胞进行RNA测序,同时对实验组人脐带间充质基质细胞进行单细胞RNA测序,并根据功能进行亚群分组,通过生物信息学分析方法描绘各个亚群标志基因热图、富集的信号通路和基因调控网络. 结果与结论:①随着传代次数的增加,人脐带间充质基质细胞中细胞程序性死亡配体1阳性细胞百分比逐渐减少;②成功构建稳定过表达细胞程序性死亡配体1的人脐带间充质基质细胞,实验组细胞程序性死亡配体1的表达量显著增加;③转录组测序数据提示过表达细胞程序性死亡配体1的人脐带间充质基质细胞能够促进免疫效应调控通路相关基因表达上调;④通过将CD4+T细胞与人脐带间充质基质细胞共培养,结果显示实验组CD4+T细胞比例明显下调;⑤基于单细胞RNA测序结果,过表达细胞程序性死亡配体1的人脐带间充质基质细胞可分为3个功能亚群,具有异质性;细胞程序性死亡配体1基因水平在1亚群表达更高,且组蛋白甲基转移酶SETDB1显著高表达可能与T细胞免疫抑制功能增强密切相关.上述结果表明:细胞程序性死亡配体1基因过表达可以显著增强人脐带间充质基质细胞的T细胞免疫抑制能力.通过单细胞RNA测序可较好地根据细胞程序性死亡配体1基因修饰人脐带间充质基质细胞的功能特性进行分群,为提高人脐带间充质基质细胞的临床疗效提供理论支持.

摘要：背景:胶原三螺旋重复蛋白1是骨形成的正向调节因子,但是其在牙周膜干细胞中的作用及机制尚未明确. 目的:探讨胶原三螺旋重复蛋白1对人牙周膜干细胞增殖、成骨分化的影响及作用机制. 方法:体外分离培养人牙周膜干细胞,用过表达胶原三螺旋重复蛋白1慢病毒载体转染细胞,通过CCK-8法和流式细胞术检测过表达胶原三螺旋重复蛋白1对牙周膜干细胞增殖活性的影响;通过碱性磷酸酶活性、茜素红染色检测过表达胶原三螺旋重复蛋白1对牙周膜干细胞成骨分化能力的影响;采用Western blot检测过表达胶原三螺旋重复蛋白1后细胞外调节蛋白激酶1/2、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2蛋白表达;采用Western blot和qRT-PCR检测阻断细胞外调节蛋白激酶1/2信号通路后,过表达胶原三螺旋重复蛋白1对牙周膜干细胞成骨分化相关因子Runt相关转录因子2、骨钙素、Osterix表达的影响. 结果与结论:①CCK-8和流式细胞术结果显示,过表达胶原三螺旋重复蛋白1能够促进牙周膜干细胞增殖;②碱性磷酸酶活性、茜素红染色显示,过表达胶原三螺旋重复蛋白1能够促进牙周膜干细胞的成骨分化;③Western blot结果显示,过表达胶原三螺旋重复蛋白1激活了细胞外调节蛋白激酶1/2信号通路;④Western blot和qRT-PCR结果显示,过表达胶原三螺旋重复蛋白1促进了Runt相关转录因子2、骨钙素、Osterix蛋白和mRNA的表达,当使用细胞外调节蛋白激酶信号通路特异性抑制剂PD98059抑制信号通路激活后,成骨相关因子表达上调出现了一定程度的抑制.以上结果提示:过表达胶原三螺旋重复蛋白1可以促进牙周膜干细胞的增殖和成骨分化,其促成骨分化作用可能与细胞外调节蛋白激酶1/2信号通路的激活有关.

摘要：背景:临床上,由于手舟骨的特殊解剖特点和内部骨小梁分布特征等往往使得骨折的治疗效果普遍不佳,常导致骨折不愈合和缺血性坏死,进而引发腕关节炎和功能丧失. 目的:利用Micro CT技术对手舟骨标本进行扫描,分析其内部显微结构特征,测量各区域骨小梁显微结构参数值,以发现手舟骨骨小梁的区域差异,旨在为手舟骨骨折的预防、治疗及骨折机制研究提供科学依据. 方法:选取5具成人尸体标本的双侧手舟骨(10例)进行Micro CT扫描,通过对手舟骨3个感兴趣区域(结节部、腰部、体部)内骨小梁的勾选与重建,详细观察手舟骨内部的显微形态特征,测量和比较各区域骨小梁显微结构参数值的差异. 结果与结论:①Micro CT图像显示手舟骨表面皮质骨相对较薄,内部充满复杂的骨小梁微观结构;靠近皮质骨的板层状骨小梁相对密集,向内部延伸成杆状骨小梁;从矢状面、冠状面和横断面上观察,腰部内骨小梁分布较为稀疏,而体部和结节部内骨小梁分布则更为致密;②手舟骨结节部的骨体积分数、骨表面积、骨表面积组织体积比、骨小梁分离度、骨小梁数目、骨小梁连通性、骨小梁连接密度、分形维数、骨矿物质密度和骨矿物质含量在左右侧别间比较差异均有显著性意义(P<0.05);腰部和体部的各骨小梁显微结构参数值在左右侧别间比较差异均无显著性意义(P>0.05);③手舟骨的骨体积、骨体积分数、骨表面积、骨表面积组织体积比、骨表面积骨体积比、骨矿物质密度和骨矿物质含量在体部与结节部、腰部之间比较差异有显著性意义(P<0.05);手舟骨的骨小梁厚度在体部与结节部之间比较差异有显著性意义(P<0.05);手舟骨的骨小梁分离度、分形维数在体部与结节部、腰部,结节部与腰部之间差异有显著性意义(P<0.05);手舟骨的骨小梁数目、骨小梁连通性、骨小梁连接密度在腰部与结节部、体部之间比较差异有显著性意义(P<0.05);手舟骨的组织体积、各向异性程度在体部、结节部、腰部之间比较差异均无显著性意义(P>0.05);④结果显示,手舟骨的骨小梁显微结构参数值存在区域性差异,其中腰部的骨密度和强度较低,是最容易发生骨折的部位,该发现从骨小梁微观结构角度为理解手舟骨骨折机制提供了理论依据;同时,此次研究揭示的手舟骨不同部位的骨小梁结构特征也为设计针对性的内固定器械提供了理论依据.

摘要：背景:目前针对创伤后僵硬性胸腰椎后凸畸形的研究多集中于整体矢状面平衡及手术干预,而病程对腰椎代偿性曲度改变及退变影响尚不明确. 目的:探讨创伤后僵硬性胸腰椎后凸畸形患者病程对腰椎退变的影响及潜在机制,为优化治疗策略提供依据. 方法:回顾性分析79例创伤后僵硬性胸腰椎后凸畸形患者的临床和影像资料,根据病程分为2组,病程≤5年为A组(n=40),病程>5年为B组(n=39).采用X射线图像测量伤椎局部后凸角、伤椎及相邻上下椎体后壁高度、腰椎前凸角、各节段腰椎椎间隙角度、骶骨倾斜角,通过Weishaupt-CT分类系统评估患者各节段腰椎小关节退变程度,Pfirrmann-MRI分级评估各节段椎间盘退变状况.比较两组患者腰背痛目测类比评分、Oswestry功能障碍指数、SRS-22 评分量表及美国脊髓损伤协会脊髓损伤分级.分析病程对创伤后僵硬性胸腰椎后凸畸形患者临床症状及影像学特征的影响. 结果与结论:①两组患者年龄、性别、腰背痛目测类比评分、骨折部位、骨折形态和美国脊髓损伤协会分级比较差异无显著性意义(P>0.05);A组患者SRS-22 评分亚总分显著高于B组(P<0.05);B组Oswestry功能障碍指数显著高于A组(P<0.05);②B组伤椎后凸角度、腰椎前凸角度、L4/5节段椎间隙角度显著大于A组(P<0.05);③A组L1/2、L2/3、L3/4、L5/S1椎间隙角度及骶骨倾斜角与B组相比差异无显著性意义(P>0.05);④B组L3/4、L4/5、L5/S1节段关节突退变程度显著重于A组(P<0.05);B组L2/3、L3/4、L4/5、L5/S1椎间盘退变程度显著重于A组(P<0.05);⑤Pearson相关性分析结果显示,B组内病程与伤椎局部后凸角度及腰椎前凸角度呈正相关(r=0.335,0.418,P<0.05);⑥创伤后僵硬性胸腰椎后凸畸形患者在长期代偿过程中,会导致腰椎前凸加大、腰椎退变加速;在腰椎曲度代偿中,L4/5为主要代偿节段,进行手术矫正时应特别注意下腰椎的曲度纠正.

摘要：背景:神经损伤后炎症微环境与少突胶质细胞的动态相互作用是神经退行性疾病和脱髓鞘疾病的核心病理环节.干细胞源性外泌体凭借天然的低免疫原性、高效的屏障穿透能力、靶向递送多样促修复因子特性,在调控少突胶质细胞分化和炎症微环境方面发挥了促进神经修复与再生的关键作用. 目的:探讨干细胞源性外泌体调控炎性微环境促进少突胶质细胞存活、分化和髓鞘修复的作用机制,为干细胞源性外泌体通过多组分协同(miRNA、蛋白、代谢物)和微环境适配治疗神经疾病提供"无细胞治疗"新范式. 方法:检索中国知网、万方数据库、PubMed数据库中2010-2025年发表的文献,中文检索词为"外泌体,干细胞,工程化,诊断,炎性微环境、少突胶质细胞,信号通路",英文检索词为"Stem cell-derived exosomes,Oligodendrocytes,Inflammatory microenvironment,signaling pathway,regulatory mechanisms",剔除与研究主题无关的文献,根据纳入及排除标准,对符合纳入标准的65篇文献进行综述分析. 结果与结论:①概述了外泌体的生物学特性及在中枢神经系统中的作用,分析了炎性微环境对少突胶质细胞的影响及外泌体的调控机制,包括miRNA介导的信号通路调节、抗炎因子分泌和免疫细胞功能调控等方面;②阐述炎症微环境对少突胶质细胞生物学行为的调控机制及在疾病发生发展中的作用;③提出基于靶向肽修饰和功能分子负载的工程化外泌体递送系统,结合中药活性成分调控策略构建无细胞治疗新范式;④从分子层面解释外泌体功能网络与髓鞘动态平衡之间的深度互作关系,为开发外泌体靶向递送系统干预神经系统脱髓鞘疾病提供了治疗新方向.

摘要：背景:作者课题组前期构建了一种新型大鼠腰椎力学模型,该模型通过特定装置将大鼠腰椎长期固定于异常前屈姿势,成功诱导L6-S1节段退变.然而,目前尚缺乏对该模型的生物力学相关评估. 目的:通过X射线片验证和有限元模型分析,评估大鼠异常前屈姿势下L6-S1节段的生物力学特性. 方法:基于课题组前期建立的SD大鼠异常前屈姿势模型,选取3只健康雌性SD大鼠,在未麻醉捆绑和麻醉放松状态下拍摄侧位X射线片,测量L6-S1椎间盘角,分析L6-S1节段在不同姿势下的椎间盘角变化;基于1只健康雌性SD大鼠的Micro-CT扫描数据,利用Mimics、Geomagic Wrap和SolidWorks重建L6-S1节段三维模型,并在ANSYS Workbench中进行网格划分、材料赋值及前屈加载模拟,计算L6-S1椎间盘各组织结构的应力分布. 结果与结论:①L6-S1椎间盘角在放松、捆绑姿势下平均值分别为(12.16±0.57)°,(1.26±0.26)°;②在L6-S1椎间盘前屈10°姿势下,椎间盘上终板、下终板、纤维环、髓核的最大等效应力分别为10.398,19.928,6.819,0.104 MPa,其中,上下终板最大von-Mises应力明显高于纤维环和髓核;③提示在L6-S1椎间盘前屈10°造模姿势下,L6-S1椎间盘角减小,致使L6-S1椎间盘形态及受力负荷发生显著变化;构建的有限元模型模拟了大鼠异常前屈姿势下L6-S1椎间盘的生物力学环境,该姿势下的上下终板承受较大等效应力,可能是此模型中理论上最早出现退行性改变的结构.

摘要：背景:增龄性退变与骨代谢失衡密切相关,在颌骨表现为牙槽骨吸收、牙齿松动甚至脱落,衰老颌骨骨髓间充质干细胞成骨向分化潜能受损是颌骨再生修复障碍的重要原因.槲皮素作为天然黄酮类化合物,具有抗氧化、抗炎及调控细胞分化的潜力,但槲皮素对衰老颌骨骨髓间充质干细胞成骨分化的影响与机制尚不明确. 目的:探究槲皮素对衰老颌骨骨髓间充质干细胞增殖、迁移、成骨分化以及衰老的影响. 方法:分离10只8周龄SD大鼠下颌骨,采用骨髓冲洗和骨片消化相结合的方法培养颌骨骨髓间充质干细胞.颌骨骨髓间充质干细胞传代培养至第3代和第7代分别作为年轻细胞组和衰老细胞组,槲皮素组在衰老细胞组的基础用槲皮素干预.采用CCK-8法检测0.01,0.1,1,10,100 μmol/L槲皮素溶液对衰老颌骨骨髓间充质干细胞增殖的影响,筛选出最适槲皮素浓度.细胞划痕实验观察细胞迁移能力;RT-qPCR、Western blot检测衰老标志物的表达;β-半乳糖苷酶染色观察阳性细胞比例.成骨诱导7 d,RT-qPCR、Western blot检测成骨相关标志物表达;成骨诱导14 d行碱性磷酸酶染色;成骨诱导21 d行茜素红染色.Western blot检测磷酸化蛋白激酶B、蛋白激酶B、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的表达. 结果与结论:①与年轻细胞组相比,衰老细胞组增殖能力下降;与衰老细胞组相比,1 μmol/L槲皮素促衰老颌骨骨髓间充质干细胞增殖效果显著(P<0.01);②与衰老细胞组相比,槲皮素组衰老颌骨骨髓间充质干细胞的迁移能力提高,β-半乳糖苷酶阳性细胞比例显著降低,衰老相关P16、P53、P21 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);③成骨诱导后,与衰老细胞组相比,槲皮素组钙结节形成能力、碱性磷酸酶染色面积以及碱性磷酸酶、骨桥蛋白和Runt相关转录因子2 mRNA、蛋白表达升高(P<0.05);④与衰老细胞组相比,槲皮素组蛋白激酶B、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05).这些结果表明槲皮素可通过调控蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路抑制多次传代引起的颌骨骨髓间充质干细胞衰老并促进成骨分化.

摘要：背景:研究发现,多发性骨髓瘤微环境具有诱导间充质干细胞成衰老表型的功能,而衰老骨髓间充质干细胞对多发性骨髓瘤细胞影响的研究鲜有报道. 目的:探讨衰老骨髓间充质干细胞通过旁分泌半乳糖凝集素3对多发性骨髓瘤细胞增殖的影响. 方法:取健康供者骨髓血,通过Ficoll密度梯度离心法和贴壁纯化法提取骨髓间充质干细胞.取第3代骨髓间充质干细胞,采用200 µmol/L过氧化氢溶液诱导2 h,再用L-DMEM完全培养基培养24 h,构建衰老骨髓间充质干细胞模型,通过β-半乳糖苷酶染色及衰老基因P21表达进行鉴定,RT-qPCR检测衰老骨髓间充质干细胞中半乳糖凝集素3的表达.收集衰老骨髓间充质干细胞上清液并通过离心浓缩制备衰老骨髓间充质干细胞条件培养基,用其培养多发性骨髓瘤细胞株U266 24 h,CCK-8检测U266细胞增殖情况,流式细胞仪检测U266细胞凋亡情况,RT-qPCR及Western blot检测U266细胞中BCL-2蛋白及mRNA表达.收集多发性骨髓瘤患者和健康人的骨髓,通过ELISA方法检测半乳糖凝集素3水平. 结果与结论:①过氧化氢诱导后,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞明显增多,P21和半乳糖凝集素3 mRNA表达上调(P<0.01);②与对照组相比,衰老骨髓间充质干细胞条件培养基培养U266细胞24 h后,细胞增殖水平升高(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05),BCL-2蛋白及mRNA表达水平增加(P<0.05);③多发性骨髓瘤患者骨髓半乳糖凝集素3水平较健康人明显增加(P<0.05).结果表明:衰老骨髓间充质干细胞可能通过旁分泌半乳糖凝集素3,上调BCL-2表达水平,促进多发性骨髓瘤细胞的增殖.

摘要：背景:乳腺癌类器官作为一种新型的体外模型,既可以模拟乳腺癌的生物学特性,也可以一定程度还原肿瘤微环境对肿瘤的影响,为乳腺癌的各类研究及精准治疗提供支持. 目的:综述近年来乳腺癌类器官技术在化疗、靶向治疗、免疫治疗的药物领域的应用现状并表述目前存在的局限性,进一步推动其在乳腺癌治疗当中的应用. 方法:第一作者于2025年6月在中国知网和PubMed数据库检索发表时间为2010年1月至2025年6月的有关文献.以"类器官,乳腺类器官,乳腺癌类器官,乳腺癌模型实验验证,精准治疗,靶向治疗,化疗,免疫治疗,药物敏感性"为中文检索词;以"organoid,breast organoid,breast cancer organoid,breast cancer experimental model,precision medicine,targeted therapy,chemotherapy,immunotherapy,drug sensitivity"为英文检索词,最终纳入58篇文献进行综述. 结果与结论:①相较于传统的乳腺癌细胞实验验证,缺少组织结构与细胞之间的相互作用验证以及体内相关微环境的验证,乳腺癌类器官原始肿瘤细胞来源多样,培养体系的不断创新,可以模拟细胞之间的相互作用,并且还原了乳腺癌及其肿瘤微环境的生物学特征,使得乳腺癌类器官成为乳腺癌研究领域最具潜力的工具之一,也为其通过药物敏感性筛选来改善临床乳腺癌患者的治疗耐药提供更大可能.②乳腺癌类器官的药敏试验结果应用于临床实践获得了不错的结果,通过常见化疗药物、靶向药物和免疫治疗药物在乳腺癌类器官中进行药敏性测试,对药物的抗肿瘤作用机制以及多种药物的协同作用进行验证,避免了在患者身上应用原发耐药以及毒性反应大的治疗药物,为患者制定个性化的治疗方案以及有试验基础的精准医疗策略.③乳腺癌类器官在药物筛选治疗等实际应用中仍存在局限,如模型构建的成功率仍然偏低、模型生长困难、缺乏血管生成的过程等,为了克服这些局限,需要提高来源组织量、完善培养体系、改进创新培养技术,才有助于更好地通过乳腺癌类器官进行全面的治疗药物选择,为制定个性化的精准医疗提供帮助.

摘要：背景:经椎间孔腰椎椎体间融合是治疗腰椎间盘突出、腰椎管狭窄和腰椎滑脱等腰椎退行性疾病主要的手术方式之一.隐性失血是指患者隐匿性丧失的血量,往往被人们忽视. 目的:使用新方法评估经椎间孔腰椎椎体间融合围术期总失血量情况,基于新方法计算得出隐性失血量,并分析其危险因素. 方法:回顾性分析2023年10月至2024年10月于苏州大学附属第二医院脊柱外科住院治疗的93例腰椎退行性疾病(腰椎管狭窄、腰椎间盘突出及腰椎滑脱等)患者的病历资料.收集患者一般资料如年龄、性别、身高、体质量、体质量指数以及是否合并有高血压、糖尿病;手术资料如手术节段数目、手术时间、美国麻醉师协会麻醉分级;实验室检查如凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、国际标准化比率、血小板计数、纤维蛋白原、D-二聚体水平.采用Pearson 或 Spearman 相关性分析探讨患者特征与术后隐性失血之间的相关性,以多元线性回归分析确定术后隐性失血的独立危险因素. 结果与结论:①新方法计算出经椎间孔腰椎椎体间融合的平均隐性失血量为(284.24±352.76)mL,占总失血量的58.6%;而传统手术方法计算出平均隐性失血量为(165.77±339.89)mL,占总失血量的34.15%,两者之间差异有显著性意义(P<0.05);②单因素分析中,隐性失血量与节段数目(r=0.213,P=0.040)和手术时间(r=0.210,P=0.043)呈正相关,与血小板计数呈负相关(r=-0.324,P=0.018);③多元线性回归分析中,血小板计数减少是影响隐性失血的独立危险因素(P=0.016);④提示新方法对于隐性失血量的估计更准确,隐性失血为围术期总失血量的重要组成部分;节段数目增多、手术时间延长、血小板计数减少是经椎间孔腰椎椎体间融合隐性失血的危险因素,其中血小板计数减少是独立危险因素.

摘要：目的:采用Meta分析人脐血间充质干细胞对膝骨关节病患者疼痛和功能的影响. 方法:以"人脐血,间充质干细胞,膝骨关节病"为中文检索词,以"human cord blood,mesenchymal stem cell,MSC,knee osteoarthritis,knee joint disease,knee joint disorders,knee OA"为英文检索词,检索中国知网、万方、维普、PubMed、Elsevier、Web of Science数据库,检索时限从各数据库建库至2024-06-13.纳入文献质量评价使用Corchrane偏倚风险评估工具和ROBINS-I工具,Meta分析选择Revman软件,对于连续性变量计算均数差,对于二分类变量计算相对危险度,另计算95%置信区间. 结果:纳入随机对照试验3篇,病例-对照研究3篇,合计248例研究对象,文献质量评价中等.Meta分析结果显示:①试验组患者目测类比评分低于对照组,差异有显著性意义(χ2=44.98,P<0.001,I2=91%);②试验组患者西安大略和麦克马斯特大学膝骨关节病指数低于对照组,差异有显著性意义(χ2=16.84,P<0.001,I2=88%);③试验组患者Lysholm膝关节功能评分高于对照组,差异有显著性意义(χ2=0.12,P=0.73,I2=0%);④试验组患者不良反应发生率高于对照组,差异有显著性意义(χ2=4.99,P<0.001,I2=20%),合并风险差为0.21,折算成所需治疗人数为5. 结论:人脐血间充质干细胞可以减轻膝骨关节病患者的疼痛,改善膝关节功能,并在安全性与有效性之间实现了良好的平衡.

摘要：背景:芦丁能够有效抗骨质疏松症,但作用机制尚不明确. 目的:探讨芦丁在中性粒细胞胞外陷阱作用下对MC3T3-E1细胞成骨的影响. 方法:①采用佛波酯刺激人源髓细胞白血病dHL60细胞,体外诱导中性粒细胞胞外陷阱形成.将dHL60细胞分4组进行培养,对照组加入Hank's平衡盐溶液,其余3组均加入50 nmol/L佛波酯;后2组再加入250 μmol/L芦丁或250 μmol/L芦丁和5 U/mL DNaseⅠ.通过流式细胞术检测dHL60细胞凋亡情况,RT-qPCR和Western blot检测中性粒细胞胞外陷阱形成标志性基因和蛋白的表达.②将MC3T3-E1细胞分为6组进行培养:对照组加入Hank's平衡盐溶液,其余5组分别加入50 nmol/L佛波酯;dHL60细胞和50 nmol/L佛波酯;100 μmol/L芦丁;dHL60细胞、50 nmol/L佛波酯和250 μmol/L芦丁;dHL60细胞、50 nmol/L佛波酯、250 μmol/L芦丁和5 U/mL DNaseⅠ.通过流式细胞仪检测在中性粒细胞胞外陷阱作用下MC3T3-E1细胞凋亡情况,碱性磷酸酶染色、茜素红染色明确在中性粒细胞胞外陷阱作用下MC3T3-E1细胞的成骨及矿化能力,RT-qPCR和Western blot检测在中性粒细胞胞外陷阱作用下MC3T3-E1细胞的成骨相关基因和蛋白表达. 结果与结论:①与空白对照组比较,芦丁能够显著抑制dHL60细胞中蛋白精氨酸脱亚胺酶4、髓过氧化物酶和中性粒细胞弹性蛋白酶的mRNA和蛋白表达(P<0.000 1);与芦丁组比较,芦丁与DNaseⅠ联合干预对蛋白精氨酸脱亚胺酶4、髓过氧化物酶和中性粒细胞弹性蛋白酶的下调作用更加明显(P<0.05),说明芦丁能够显著抑制中性粒细胞胞外陷阱的形成;②将dHL60诱导出中性粒细胞胞外陷阱后与MC3T3-E1共培养,MC3T3-E1细胞的Runt相关转录因子2、β-连环蛋白和骨形态发生蛋白2的mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.000 1),凋亡率显著上升(P<0.000 1),说明中性粒细胞胞外陷阱在体外能显著抑制MC3T3-E1细胞的成骨能力,并促进细胞凋亡;在经芦丁单独干预或芦丁与DNaseⅠ联合干预后,中性粒细胞胞外陷阱作用下的MC3T3-E1细胞的凋亡和成骨能力显著改善,且芦丁与DNaseⅠ联合干预的作用较芦丁单独干预更为显著,表明芦丁可能抑制中性粒细胞胞外陷阱的形成,从而改善MC3T3-E1细胞的成骨能力;③分子对接和分子动力学模拟显示,芦丁与蛋白精氨酸脱亚胺酶4、髓过氧化物酶和中性粒细胞弹性蛋白酶靶蛋白的结合作用良好,说明芦丁能够靶向抑制中性粒细胞胞外陷阱的形成.

摘要：背景:目前,颈椎旋转手法和颈椎旋提手法治疗神经根型颈椎病的生物力学差异尚未得到系统阐述. 目的:对比颈椎旋转手法与旋提手法治疗因颈椎间盘突出导致神经根型颈椎病的生物力学差异,为临床合理选择手法提供依据. 方法:招募1名因颈椎间盘左后侧突出压迫神经根导致神经根型颈椎病的27岁亚洲男性患者,提取其头颅和颈椎CT扫描数据构建头颅和全颈椎有限元模型.模型验证后将颈椎旋转手法和旋提手法的关键参数加载到模型中,对比分析两种手法对椎间盘、关节突关节、脊髓及神经根等应力、椎间盘位移以及颈椎间孔容积等指标的影响. 结果与结论:①在Von-Mise 应力方面,颈椎旋转手法对椎间盘纤维环、髓核、关节突关节产生的最大应力分别为0.903,0.139,2.186 MPa,较旋提手法(0.765,0.123,1.682 MPa)显著增加18%,13%,30%;而脊髓和神经根最大应力为2.547 MPa,较旋提手法(2.738 MPa)降低7%;②在位移方面,颈椎旋转手法对椎间盘突出侧最大的向前位移为1.067 mm,比旋提手法(0.960 mm)多出11.1%;③在椎间孔容积变化方面,两种手法实施后较实施前均有增加,其中旋转手法增加15.5%,旋提手法增加19.8%,后者扩大椎间孔容积的效果更显著;④提示颈椎旋转手法在促进突出椎间盘向前位移方面存在优势,但对椎间盘及关节突关节产生的应力较高,易引发椎间盘损伤;旋提手法会使脊髓和神经根承受稍高应力,但能更有效地扩大椎间孔容积,减少椎间盘结构损伤风险;临床治疗时,应依据患者具体病情,审慎权衡两种手法的利弊,合理选择应用.

摘要：背景:近年来,miRNA在脑小血管病的发病机制和诊疗手段中受到广泛关注,其参与调控脑小血管病的多种病理过程. 目的:综述miRNA在脑小血管病发病机制、诊断、治疗中的作用,为脑小血管病的早期诊断提供新型潜在生物学标志物和有效治疗靶点. 方法:以"micro RNA,cerebral small vessel disease,blood-brain barrier,chronic cerebral hypoperfusion,inflammation,apoptosis,diagnosis,biomarkers"为英文检索词和"外泌体miRNA,脑小血管病"为中文检索词,分别检索PubMed及中国知网,检索时限为各数据库建库至2025年1月.通过阅读文题及摘要进行初步筛选,排除研究内容相关性差及内容重复的文献,最终纳入72篇文献进行归纳总结. 结果与结论:①通过对外泌体miRNA的生物学功能及特性进行挖掘探讨,证实外泌体miRNA是脑小血管病发生发展过程中的重要相关成分;②外泌体miRNA参与调控脑小血管病的多种病理过程,通过保护血脑屏障、改善慢性脑灌注不足、减轻炎症反应、抑制细胞凋亡等多个方面,在脑小血管病病理机制中发挥重要作用;③外泌体miRNA通过靶向多个信号通路在病理机制的不同发展阶段进行干预,可以有效针对脑小血管病的不同病理环节;④多种外泌体miRNA联合使用可以有效改善脑小血管病进程,不同miRNA的调控作用在病理机制的各个阶段发挥不同作用,构建miRNA作用网络对于调控脑小血管病发展具有重要意义;⑤外泌体miRNA广泛稳定存在于各种体液中,其在脑小血管病患者尿液、血清、血液等体液中的特异性与显著性表达可作为脑小血管病患者诊断的有效依据;⑥目前临床主要治疗手段为注射miRNA模拟物或拮抗剂调节下游靶基因的表达,如何发挥miRNA最有效的治疗效果仍需深入研究;⑦miRNA作为外泌体内容物在治疗脑小血管病中具有极大的应用前景,未来应进一步深入挖掘其作用机制,为临床治疗脑小血管病方案提供有效思路并进一步优化.

摘要：临床试验中样本量估算现如今已经得到了足够多的重视,各种临床试验相关指南如CONSORT,SPIRIT都对此进行了详尽规范.然而,相对而言动物实验中出现的相同问题似乎并未如其在临床试验中那样被所关心.随着科学研究的发展,各学科对实验动物的需求量不断增长;伦理学规范也引发人们对动物福利和科学道德的重视.此外,实验动物样本数量的模棱两可甚至会导致研究结果被误读.ARRIVE(动物研究:体内实验报告)指南中明确要求动物实验报告解释如何确定实验动物所需样本量,并提供样本量估算的详细信息.